1. 曾经一度怀疑线性ccd坏掉了,劝老板再买一个,可老板坚持说不可能的,(没可能坏的啦)。事实证明他是对的。
2. 将拉曼光谱从显微镜光路拆下,倒置固定在光学平台上。
3. 仔细观察光路,拆下大部分零件,拆前拍照记下原始位置。fig. 4
4. 用白胶水粘紧光栅与反射镜。
5. 拆下两块滤光片,bruker共---拉曼报价,用一块反射镜反射回去,微调半透半反镜并用小孔检查光路,让入射光与出射光重合,使反射光透过pinhole,石家庄共---拉曼报价,并且在ccd 镜头前看到光栅散射出的长条光斑。
6. 仔细调节laser diode 后方的三个调整螺丝,同时微调pinhole的位置(上方两个机米螺丝,下方一个弹性机米螺丝,前方两个紧固螺丝),使透过pinhole的光强达到大且光路共轴垂直。耐心缓慢旋转每一个旋钮体会光斑的强度与移动趋势。(难的一步)
7. 将外壳从光学平台卸下并封装好,复原。倒置接回显微镜光路,并仔细调两个反射镜的四个旋钮,使光斑在屏幕正中央。
8. 安装后,激光共---拉曼报价,调节显微镜的上方卤灯的明暗,观察到有信号强弱的变化,若没有,拆掉,重复上述步骤 2-7。
9. 观察到明暗,使用标准样品,用长积分时间(20s),观察到拉曼信号。fig.7(a)
10. 使用软件上的校准功能(specify calibration peaks),用polystyrene样品重新校准。
11. 拆下再次做细微调整让信号强。fig.7(b)
1.拉曼效应 光照射到物质上发生弹性散射和非弹性散射. 弹性散射的散射光是与激发光波长相同的成分.非弹性散射的散射光有比激发光波长长的和短的成分, 统称为拉曼。通俗一点说就是一束光照到某个物体上,会反射与原波长相同和不同的两种光,相同的叫瑞利散射,不同的就叫拉曼散射。拉曼散射又分为两种,一种波长比原来的小叫斯托克斯拉曼,还有一种比原来的波长大叫反斯托克斯线。
拉曼光谱是研究生物大分子的有力手段,由于水的拉曼光谱很弱、谱图又很简单,故拉曼光谱可以在接近自然状态、活性状态下来研究生物大分子的结构及其变化。
生物大分子的拉曼光谱可以同时得到许多---的信息:
(1)蛋白质二级结构:α-螺旋、β-折叠、无规卷曲及β-回转
(2)蛋白质主链构像:---ⅰ、ⅲ,c-c、c-n伸缩振动
(3)蛋白质侧链构像:---氨酸、酪氨酸、色氨酸的侧链和后二者的构像及存在形式随其微环境的变化
(4)对构像变化敏感的羧基、巯基、s-s、c-s构像变化
(5)生物膜的脂肪酸碳氢链旋转异构现象。
(6)dna分子结构以及和dna与其他分子间的作用。
(7)研究脂类和生物膜的相互作用、结构、组分等。
(8)对生物膜中蛋白质与脂质相互作用提供重要信息。
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